产品目录

本制品主要用于骨、牙齿等钙含量丰富的组织脱钙，具有脱钙时间长、对骨组织的损伤少、酶活性（碱性磷酸酶）和细胞抗原性保存较好等特点，制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。

在病理实验制作切片时，我们会经常碰到一些含钙组织，而且钙十分坚硬。由于组织中的钙和石蜡之间的密度不同，含钙的组织一般不能直接制作切片。骨组织含钙量最多。除了骨组织之外其它组织也可发生钙化，在组织中形成钙化区，所以需要经过脱钙过程。脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。

乙二胺四乙酸（EDTA）与羟基磷灰石结晶的外层钙结合，形成可溶性的非离子化合物，同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解，pH中性时可起螯合作用。

• 为使脱钙更为充分，每次最好更换新液，这既弃去了脱掉的钙盐，增加脱钙强度，又起到降低脱钙温度的作用。
  
• 脱钙时间以脱钙完成为标准：以大头针能轻易刺进骨密质为准。
  
• 脱钙温度不要太高，一般以室温（25℃）为宜，高温可加快脱钙速度，但可破坏组织中的核酸而影响染色效果。低温（4℃）则会减慢脱钙速度，使组织在脱钙液中浸泡过久而引起损伤。
  
• 为了提高EDTA的脱钙速度，骨组织取材尽量取薄。
  
• 为了提高EDTA的脱钙速度，也可以采用微波脱钙。用微波炉辅助脱钙可以大大缩短脱钙时间，以微波间歇脱钙，每次辐射1分钟，每次辐射之间都将烧杯移至室温，冷却5分钟，以保证每次的微波辐射脱钙液的温度不至于太高。脱钙时脱钙液温度过高，易导致假阴性，背景色深等缺点。因此，在时间要求不紧迫的前提下，该方法也不应是首选。
  
• 为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织的抗原不受破坏，需要对含钙的组织充分固定之后再进行脱钙。然后再行常规制片。

• 将骨组织截成0.5×0.3×0.2cm大小骨片，生理盐水清洗后立即投入冷冻的固定液中，4℃固定12～24h；固定结束后骨片在0.2M磷酸缓冲液中充分漂洗。
  
• 漂洗后投入脱钙液中，室温下脱钙，每日检查脱钙情况，直至骨片脱钙完全为止。脱钙结束后，骨片用蒸馏水冲洗20min，脱钙液每隔4～5天更换一次新液，经过3次更换新液后，此后每天更换新液，但请根据具体实验具体分析。以大头针能刺进骨密质为完成脱钙标准。
  
• 然后进入常规脱水处理程序并包埋、切片。